Resultado da pesquisa (2)
Termo utilizado na pesquisa Toxinas botulínicas
#1 - Toxicological sensitivity and specificity of the micro-complement fixation test for the detection of botulinum toxins C and D in culture medium and liver of mice, 18(2):47-52
Abstract in English:
ABSTRACT.- Menegucci E.A., Dutra I.S. & Döbereiner J. 1998. [Toxicological sensitivity and specificity of the micro-complement fixation test for the detection of botulinum toxins C and D in culture medium and liver of mice.] Sensibilidade toxicológica e especificidade do teste de microfixação de complemento na detecção de toxinas botulínicas C e D em meio de cultura e fígado de camundongo. Pesquisa Veterinária Brasileira 18(2):47-52. Depto Apoio, Produção e Saúde Animal, Unesp-Campus de Araçatuba, Cx. Postal 533, Araçatuba, SP 16015-050, Brazil.
The toxicological sensitivity and specificity of the micro-complement fixation test (MCF) for the detection of botulinum toxins C and D were studied in supernatants of the bacterial cultures and in livers of mice inoculated with lethal and sublethal doses. Botulinum toxins C and D were produced in Hemoline culture medium, titered through the determination of LD50 by the mouse test and adjusted to dilutions of 10, 1, 0.1, 0.01 and 0.001 LD50 Two experimental models were used to determine the toxicological sensitivity of MCF in the supernatant of the culture medium with the dilutions described, and also in liver extracts of mice weighing 20 g and inoculated with the same dilutions. Detection of the botulinum toxins was attempted in liver extracts of mice which had received lethal doses of the respective toxins, and in others which had been inoculated with sublethal doses and were sacrificed in intervals of 5 days. The results show that the toxicological sensitivity of MCF, regarding the two types of toxins at the level of 0.001 LD50, was 100% when the supernatants of the culture medium were tested; this means that the sensitivitywas 100 times higher than with the mouse test. The toxicological sensitivity of MCF in the liver extracts of mice inoculated with 1 and 10 LD50 of botulinum toxins C and D was inferior, giving values of 100, 80, 89 and 72% respectively. By this test it was also possible to detect botulinum toxins type C and D in liver extracts of mice inoculated with sublethal doses, up to 15 days after the injection. The specificity of MCF was 88% and 92%, when liver extracts of healthy contral mice were tested and when challenged with antitoxins C and D; and 100% when challenged with the supernatant of the culture medium. These results indicate that MCF could be of importance for research and could substitute in vivo tests.
Abstract in Portuguese:
RESUMO.- Menegucci E.A., Dutra I.S. & Döbereiner J. 1998. [Toxicological sensitivity and specificity of the micro-complement fixation test for the detection of botulinum toxins C and D in culture medium and liver of mice.] Sensibilidade toxicológica e especificidade do teste de microfixação de complemento na detecção de toxinas botulínicas C e D em meio de cultura e fígado de camundongo. Pesquisa Veterinária Brasileira 18(2):47-52. Depto Apoio, Produção e Saúde Animal, Unesp-Campus de Araçatuba, Cx. Postal 533, Araçatuba, SP 16015-050, Brazil.
No presente estudo pretendeu-se verificar a sensibilidade toxicológica e especificidade do Teste de Microfixação
de Complemento (MCF) na detecção de toxinas botulínicas C e D no sobrenadante de cultivas bacterianos e em fígados de camundongos inoculados com doses letais e subletais. As toxinas foram produzidas em meio de cultura Hemoline, tituladas através da determinação da DL50 pelo Bioensaio em Camundongo e diluídas nas concentrações de 10, 1, 0, 1, 0,01 e 0,001 DL50. Desta forma, foram utilizadas em dois modelos experimentais, onde foi determinada a sensibilidade toxicológica do MCF no sobrenadante do meio de cultura com as diluições descritas acima e ainda em extratos hepáticos de camundongos com peso corporal de 20g, inoculados com as mesmas diluições. A tentativa de evidenciação das toxinas botulínicas nos extratos hepáticos de camundongos foi realizada através da sua extração após a morte pela administração das doses letais e ainda pelo sacrifício dos animais inoculados -com doses subletais, em intervalos de 5 dias. Os resultados evidenciaram uma sensibilidade toxicológica para o MCF de 100% para os dois tipos de toxinas ao nível de 0,01 DL50, quando testados os sobrenadantes de meio de cultura, portanto 100 vezes superior ao Bioensaio em Camundongo. A sensibilidade toxicológica do MCF, quando examinados extratos hepáticos de camundongos inoculados com 1 e 10 DL50 de toxinas botulínicas C e D, foi inferior, com valores de 100, 80, 89 e 72%, respectivamente. Pelo teste foi possível detectar toxinas botulínicas tipos C e D nos extratos hepáticos de camundongos inoculados com doses subletais até 15 dias após a sua inoculação. A especificidade do MCF foi de 88 e 92%, quando testados extratos hepáticos de camundongos sadios, e confrontados com as antitoxinas C e D; e 100% no sobrenadante do meio de cultura. Os resultados apontam para uma possível utilização do teste como importante instrumento de pesquisa e ainda na eventual substituição dos testes in vivo pelas suas implicações éticas e limitações práticas.
#2 - Diagnosis of botulismo of cattle in Brazil by micro-complement fixation
Abstract in English:
The heat induced micro-complement-fixation test was used for the laboratory diagnosis of botulism in cattle. The following specimens were collected in southeastem and central-westem Brazil: Thirty six samples of blood serum, liver and rumen liquid from 23 bovines with clinical signs of botulism (a condition commonly called "doença da vaca caída" - fallen cow disease) and from 1 bovine inoculated subcutaneously with botulinum type C toxin. Samples of blood serum, liver and rumen liquid collected from healthy bovines were used as negative controls. Sixteen out of 17 serum samples were positive for botulinum toxin in cattle with clinical signs of acute, subacute and chronic botulism. All 9 liver samples were positive including those from chronic cases. Two samples of rumen liquid from bovines with the acute disease gave a positive test, but 2 other chronic cases were negative. All 3 samples collected from the bovine with subacute clinical sigos gave positive results. From 36 samples examined, 31 were positive; of these 2 were of type C, 5 type D and 24 samples had to be grouped within the CD complex. All samples gave negative results with the mouse bioassay, including the material collected from the experimental case. In conclusion at least one sample of each of the 24 cases examined gave a positive result for botulinum toxin; thus this highly sensitive test confirmed the diagnosis that the "doença da vaca caída" is indeed botulism, caused by type C and D toxins.
Abstract in Portuguese:
Foi utilizada a técnica de Microfixação de Complemento Induzida pelo Aquecimento para o diagnóstico laboratorial do botulismo em bovinos. Neste sentido foram colhidas, nas regiões Sudeste e Centro-Oeste do Brasil, 36 amostras constituídas por soro sangüíneo, fígado e líquido ruminal de 23 bovinos com quadro clínico de botulismo, vulgarmente conhecido como “doença da vaca caída”, e de 1 bovino intoxicado experimentalmente pela toxina botulínica tipo C. Como controle negativo foram utilizados soro sangüíneo, fígado e líquido ruminal de bovinos sadios. De 17 soros examinados de bovinos com quadros clínicos agudo, subagudo e crônico, 16 foram positivos para a presença de toxina; todas as 9 amostras de fígado também foram, positivas, mesmo de animais com intoxicação crônica. Duas amostras de líquido ruminal de bovinos com doença aguda foram, positivas no teste, enquanto 2 amostras colhidas de animais com evolução crônica foram negativas. As 3 amostras oriundas do bovino intoxicado experimentalmente e apresentando evolução subaguda, foram positivas na Microfixação. Das 36 amostras examinadas, 31 foram positivas no teste, sendo 2 pertencentes ao tipo C, 5 ao tipo D, e 24 agrupadas dentro do complexo CD. Todas essas amostras foram negativas no Bioensaio em camundongo, inclusive o material colhido do bovino intoxicado experimentalmente. Com base nos resultados, e tendo como referência o Bioensaio em camundongo, a Microfixação de Complemento demonstrou um excelente desempenho, permitindo o diagnóstico laboratorial de botulismo em pelo menos um material de cada um dos 24 casos examinados, confirmando assim o diagnóstico de que a "doença da vaca caída" é de fato botulismo causado pelas toxinas C e D.
